Tiub emparan ialah tiub ringkas yang boleh menahan kelajuan dan tekanan putaran tinggi, seperti mengasingkan beberapa sampel dan mengasingkan sedimen supernatan.Tiub emparan ultraturasan mempunyai dua bahagian yang serupa dengan tiub dalam dan tiub luar.Tiub dalam ialah membran dengan berat molekul tertentu.Semasa sentrifugasi berkelajuan tinggi, mereka yang mempunyai berat molekul yang lebih kecil akan bocor ke dalam tiub bawah (iaitu tiub luar), dan mereka yang mempunyai berat molekul yang lebih besar akan terperangkap dalam tiub atas (iaitu tiub dalam).Ini adalah prinsip ultrafiltrasi dan sering digunakan untuk menumpukan sampel.
Tiub emparan ultrafiltrasi biasanya boleh digunakan tanpa prarawatan, tetapi untuk pemprosesan sampel protein, terutamanya untuk larutan protein cair (< 10ug / ml), kadar pemulihan kepekatan dengan membran ultrafiltrasi selalunya tidak kuantitatif.Walaupun bahan PES meminimumkan penjerapan tidak spesifik, sesetengah protein, terutamanya apabila ia cair, mungkin menghadapi masalah.Tahap pengikatan tidak spesifik berbeza dengan struktur protein individu.Protein yang mengandungi domain bercas atau hidrofobik lebih berkemungkinan mengikat secara tidak boleh balik pada permukaan yang berbeza.Prarawatan pasif pada permukaan tiub emparan ultraturasan boleh mengurangkan kehilangan penjerapan protein pada permukaan membran.Dalam kebanyakan kes, prarawatan lajur sebelum menumpukan larutan protein cair boleh meningkatkan kadar pemulihan, kerana penyelesaian itu boleh mengisi tapak penjerapan protein kosong yang terdedah pada membran dan permukaan.Kaedah pempasifan adalah untuk merendam lajur dengan jumlah larutan pempasifan yang lebih tinggi selama lebih daripada 1 jam, basuh lajur dengan teliti dengan air suling, dan kemudian sentrifuge sekali dengan air suling untuk mengeluarkan sepenuhnya larutan pempasifan yang mungkin kekal pada filem. .Berhati-hati untuk tidak membiarkan filem kering selepas pasif.Jika anda ingin menggunakannya kemudian, anda perlu menambah air suling steril untuk memastikan filem itu lembap.
Tiub emparan ultraturasan biasanya tidak boleh disterilkan dan digunakan semula.Memandangkan harga satu tiub tidak murah, ramai orang cuba menggunakannya semula - pengalamannya ialah membersihkan permukaan membran dengan air suling berkali-kali dan mengemparkannya sekali atau dua kali.Tiub kecil yang boleh disentrifugasi secara terbalik boleh direndam dalam air suling dan kemudian disentrifugasi secara terbalik untuk lebih banyak kali, yang akan menjadi lebih baik.Ia boleh digunakan untuk sampel yang sama berulang kali, dan boleh direndam dalam air suling apabila tidak digunakan, tetapi pencemaran bakteria hendaklah dielakkan.Jangan campurkan sampel yang berbeza.Sesetengah orang mengatakan bahawa merendam dalam 20% alkohol dan 1n NaOH (natrium hidroksida) boleh menghalang pertumbuhan bakteria dan menghalang pengeringan.Selagi membran ultrafiltrasi menyerang air, ia tidak boleh dibiarkan kering.Walau bagaimanapun, yang lain mengatakan bahawa ia akan memusnahkan struktur membran.Walau apa pun, pengeluar biasanya tidak menyokong penggunaan semula.Penggunaan berulang akan menyekat saiz liang membran penapis, dan juga menyebabkan kebocoran cecair, yang akan menjejaskan keputusan eksperimen.
Masa siaran: Sep-05-2022