Beberapa enzim yang biasa digunakan dalam eksperimen PCR

Tindak balas rantai polimerase, disingkatkan sebagaiPCRdalam bahasa Inggeris, ialah teknik biologi molekul yang digunakan untuk menguatkan serpihan DNA tertentu.Ia boleh dianggap sebagai replikasi DNA khas di luar badan, yang boleh meningkatkan jumlah DNA yang sangat kecil.Semasa keseluruhanPCRproses tindak balas, satu kelas bahan memainkan peranan penting – enzim.

1. Taq DNA

Dalam eksperimen pada hari-hari awalPCR, saintis menggunakan Escherichia coli DNA polymerase I, Tetapi terdapat masalah dengan enzim ini: ia perlu menambah enzim baru setiap kali kitaran dilakukan, yang menjadikan langkah operasi sedikit rumit dan sukar untuk diperkuat sepenuhnya secara automatik.Masalah ini telah diselesaikan selepas saintis secara tidak sengaja mengasingkan polimerase DNA Taq daripada Thermus aquaticus pada tahun 1988. Sejak itu, penguatan automatik DNA telah menjadi kenyataan.Penemuan enzim ini juga membuatPCRteknologi teknologi yang mudah, praktikal dan universal.Pada masa ini, polimerase DNA Taq ialah polimerase yang paling biasa dalam kit DNA.

2. PfuDNA

Seperti yang dinyatakan di atas, Taq DNase mempunyai pepijat yang besar, jadi saintis telah mengubah suai Taq DNA polymerase pada tahap tertentu untuk mengelakkan amplifikasi tidak spesifik akibat ketidakpadanan, mengakibatkan keputusan ujian tidak tepat.Tetapi pengubahsuaian Taq DNA polymerase boleh menghalang aktiviti DNA polimerase pada suhu bilik.Polimerase PfuDNA boleh mengimbangi kelemahan polimerase DNA Taq di atas, supaya tindak balas PCR dapat dijalankan secara normal, dan kadar kejayaan penguatan gen sasaran dapat dipertingkatkan dengan berkesan.

3. Transkripase Terbalik

Transkripase terbalik ditemui pada tahun 1970. Enzim ini menggunakan RNA sebagai templat, dNTP sebagai substrat, mengikut prinsip pasangan bes, dan mensintesis untaian tunggal DNA pelengkap kepada templat RNA dalam arah 5′-3′.Transkripase terbalik terutamanya bergantung kepada aktiviti polimerase DNA daripada templat DNA atau RNA dan oleh itu tidak mempunyai aktiviti exonuclease 3'-5'.Walau bagaimanapun, ia mempunyai aktiviti RNase H, yang mengehadkan panjang sintesis transkripase terbalik ke tahap tertentu.Oleh kerana kesetiaan rendah dan kestabilan transkripase terbalik liar, saintis juga mengubah suainya.

UntukPCReksperimen, bahan guna habis utama ialah：tiub PCR individu, tiub PCR 4/8 jalur, plat PCR.

Labio'sBahan habis pakai PCRmempunyai perkara berikutkelebihan:

plat PCR: Keserasian basikal haba yang luas;Kontras tinggi, pengenalan telaga mudah;pantulan pendarfluor telaga; baikpemindahan haba;DNase, RNase, DNA, perencat PCR yang diperakui dan bebas pirogen yang diuji.

Tiub PCR individu: Tahan penyejatan; baikpemindahan haba;kejelasan optik yang sangat baik; DNase, RNase, DNA, perencat PCR yang diperakui, dan bebas pirogen yang diuji.

Tiub PCR 4/8 jalur: Dinding ultra-nipis; kejelasan tinggi; pantulan pendarfluor yang baik;boleh digunakan dalam industri farmaseutikal, industri makanan, dan biologi molekul; bahan PP dara berkualiti tinggi; DNase, RNase, DNA, perencat PCR yang diuji dan bebas pyrogen yang diuji.